软下疳的主要从以下几个方面进行检查诊断标准
一、发病前2-5天是否有过不洁性交史。
二、是否有典型的临床表现和发病经过。男性的包皮内外，包皮系带及龟头等处；女性的大、小阴唇、尿道口等部位有一处或多处溃疡、有疼痛与触痛。
三、是否在单侧的腹股沟有“横痃”，有触痛，而形成溃疡排脓。
四、若是属于不典型软下疳，则需要结合实验室检查来进行诊断，常用方法有：直接涂片和PCR检测
（1）直接涂片 杜克雷菌有特殊的菌体形态和排列方式，如果在涂片中找到这种典型形态的病菌，则有可能是该病。
（2）PCR检测杜克雷菌，此法可作为诊断依据，是目前常用的方法。根据发病前的性接触史，尤其是不洁性交史，典型的临床表现和经过，较短的潜伏期后发生软而扁的丘疹、脓疱、溃疡，单侧性的化脓性淋巴结炎，直接镜检和培养检出杜克雷嗜血杆菌，PCR检测杜克雷嗜血杆菌DNA，即可作出诊断。
五、通过鉴别诊断性检查
（1）姬姆萨染色法 肉芽肿荚膜杆菌阴性，以除外腹股沟肉芽肿。
（2）暗视野检查梅毒螺旋体阴性。
（3）梅毒的血清学试验阴性，以除外梅毒。
从病损形态上，软下疳还应注意与一些疾病相鉴别，主要有
1、与梅毒的硬下疳相鉴别
软下疳性质柔软，脓性分泌物多，外观污秽，有炎症反应表现为红肿热痛，溃疡边缘不规则，具有潜蚀性，基本凹凸不平，可自体传染；梅毒的硬下疳为软骨样溃疡，不痛，无分泌物，基底较硬，不能自体传染。
2、与腹股沟淋巴肉芽肿相鉴别
腹股沟淋巴肉芽肿的溃疡初为单发结节，触之易出血，溃疡基底为肉红色，污秽、有臭味，无疼痛。
3、与急性女阴溃疡相鉴别
急性女阴溃疡患者，可无性病接触史，见于年轻与未婚妇女，易反复发作，溃疡分泌物涂片检查可见粗枝大杆菌。
判断软下疳治疗有效及痊愈的标准
1、临床上溃疡处疼痛和脓液消失，出现新生上皮组织，月状的淋巴结消退，溃疡消失愈合。
2、在原溃疡处每周作一次病原菌培养，检测3次均为阴性，即可判愈。
3、软下疳早期发现及时治疗、能完全恢复正常，晚期由于损害严重、治愈后也会留下疤痕组织。
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